Plasmide Double Nickase (h) Integrin β5/ITGB5: sc-401017-NIC

ITGB5 code l’intégrine β5, un récepteur d’adhérence transmembranaire qui s’hétérodimérise principalement avec l’intégrine αV pour former αVβ5, reliant des ligands de la matrice extracellulaire au cytosquelette d’actine. Ce récepteur participe à l’assemblage des adhésions focales et à une signalisation bidirectionnelle qui régule l’adhérence, l’étalement, la migration et la mécanotransduction cellulaires via des voies telles que FAK/SRC, PI3K–AKT et MAPK. αVβ5 contribue également à une signalisation associée à l’endocytose et peut influencer la dynamique d’activation de TGF‑β selon le contexte cellulaire. Une expression dérégulée d’ITGB5 ou une signalisation des intégrines altérée ont été associées à des modifications du comportement invasif, des réponses angiogéniques et des programmes de remodelage observés dans plusieurs modèles de cancers et de maladies fibrotiques.

Integrin β5/ITGB5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGB5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGB5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGB5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGB5.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.