Integrin α5/ITGA5/CD49e Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400546-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Integrin α5/ITGA5/CD49eO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Integrin α5/ITGA5/CD49e (h) e o Plasmídeo Double Nickase Integrin α5/ITGA5/CD49e (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ITGA5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Integrin α5/ITGA5/CD49e Anticorpo (C-9): sc-376199
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Integrin α5/ITGA5/CD49e Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400546-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α5/ITGA5/CD49e Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400546-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGA5 codifica a integrina α5 (CD49e), uma subunidade α que heterodimeriza com a β1 para formar o recetor de fibronectina α5β1, um mediador-chave da adesão célula–matriz extracelular e da mecanotransdução. A ligação à fibronectina desencadeia a montagem de adesões focais e a sinalização através das vias FAK/SRC, PI3K–AKT e MAPK, coordenando a remodelação do citoesqueleto de actina, a migração, a proliferação e a sobrevivência. A dinâmica de adesão dependente de ITGA5 influencia a transição epitélio–mesênquima, programas angiogénicos e a remodelação tecidular por meio de crosstalk com GTPases Rho e a sinalização de recetores de fatores de crescimento. A atividade desregulada de α5β1 é frequentemente estudada em contextos de invasão e metástase tumoral, fibrose e fisiopatologia vascular e inflamatória, em que interações alteradas com a matriz conduzem a um comportamento celular aberrante.
Integrin α5/ITGA5/CD49e O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITGA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITGA5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITGA5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITGA5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.