Particules Lentivirales d'Activation (h) Integrin α4/ITGA4/CD49d: sc-401336-LAC

ITGA4 code l’intégrine α4 (CD49d), une sous-unité α qui s’hétérodimérise avec β1 (VLA-4) ou β7 pour former des récepteurs d’adhérence essentiels au trafic des leucocytes et à l’homing tissulaire. En se liant à des ligands tels que VCAM1 et la fibronectine, l’intégrine α4 coordonne les interactions cellule–cellule et cellule–matrice qui régulent l’adhérence ferme, la migration transendothéliale et l’organisation de la synapse immunologique. La signalisation d’ITGA4 s’articule avec la dynamique des adhérences focales et des kinases en aval, notamment les voies FAK/Src, PI3K–AKT et MAPK, modulant le remodelage du cytosquelette et des signaux de survie dans les cellules mobiles. Une activité dérégulée de l’intégrine α4 a été associée au recrutement de cellules inflammatoires et à des pathologies à médiation immunitaire, et elle est largement étudiée dans les hémopathies malignes et les processus métastatiques, où l’adhérence et les interactions avec la niche influencent la biologie de la maladie.

Les particules d'activation lentivirales Integrin α4/ITGA4/CD49d (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de ITGA4 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Integrin α4/ITGA4/CD49d (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription ITGA4, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Integrin α4/ITGA4/CD49d. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif ITGA4 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.