Plasmide Double Nickase (m) Integrin β3/ITGB3/CD61: sc-421175-NIC

Le gène murin *Itgb3* code l’intégrine β3 (ITGB3/CD61), un récepteur d’adhésion transmembranaire qui s’associe à αIIb ou αV pour former des intégrines hétérodimériques essentielles à l’agrégation plaquettaire, à l’adhésion cellule–matrice et à la signalisation « outside-in/inside-out ». ITGB3 régule la dynamique des adhésions focales et le remodelage du cytosquelette via des voies incluant FAK/Src, PI3K–AKT et les GTPases de la famille Rho, coordonnant la migration, la survie et la mécanotransduction. Dans des contextes immunitaires et stromaux, les interactions médiées par ITGB3 avec des ligands de la matrice extracellulaire influencent le trafic inflammatoire et le remodelage tissulaire, tandis qu’une signalisation intégrinique altérée a été associée, dans des modèles expérimentaux, à des dysfonctionnements de l’hémostase ainsi qu’à des phénotypes aberrants du compartiment vasculaire et du microenvironnement tumoral. Ces propriétés font d’*Itgb3* une cible précieuse pour étudier les réseaux de signalisation dépendants des intégrines, la régulation génique dépendante de l’adhésion et les réponses spécifiques au contexte aux stimuli biomécaniques.

Integrin β3/ITGB3/CD61 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Itgb3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Itgb3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Itgb3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Itgb3.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.