Plasmide Double Nickase (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c: sc-421161-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin α3/ITGA3/CD49c Double Nickase (m) et le plasmide Integrin α3/ITGA3/CD49c Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Itga3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin α3/ITGA3/CD49c Antibody (A-3): sc-374242
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c | sc-421161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) Integrin α3/ITGA3/CD49c | sc-421161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Itga3 code l’intégrine α3 (CD49c), qui s’hétérodimérise avec l’intégrine β1 pour former un récepteur de la laminine, médiant l’adhésion cellule–matrice extracellulaire et l’organisation de la membrane basale. La signalisation dépendante d’ITGA3 régule la dynamique des adhérences focales, le remodelage du cytosquelette et la polarité des cellules épithéliales via des voies comprenant FAK/Src, PI3K–AKT et MAPK, influençant la migration, la prolifération et la survie. Dans les tissus murins, l’intégrine α3 contribue à l’intégrité épithéliale dans des organes tels que la peau, le poumon et le rein, et sa dérégulation est fréquemment étudiée dans des contextes d’adhésion altérée, d’inflammation et de phénotypes invasifs pertinents pour la biologie du cancer et le remodelage tissulaire.
Integrin α3/ITGA3/CD49c Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Itga3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Itga3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Itga3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Itga3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.