Plasmide CRISPR/Cas9 KO Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2): sc-421161-KO-2

Présentation

Itga3 code l’intégrine α3 (ITGA3/CD49c), une sous-unité α qui s’associe à β1 pour former l’intégrine α3β1, capable de se lier à la laminine et médiateur clé de l’adhérence cellule–matrice extracellulaire. Via la signalisation des adhésions focales, ITGA3 influence l’organisation du cytosquelette et active des voies en aval telles que FAK/Src, PI3K–AKT et MAPK afin de réguler la migration, la survie et la morphogenèse épithéliale. Dans les tissus de souris, l’intégrine α3 contribue aux interactions avec la membrane basale et à l’architecture de la barrière épithéliale, ce qui la relie à des processus tels que le remodelage associé à la cicatrisation et la polarité cellulaire. Les altérations de la signalisation de l’intégrine ITGA3 sont fréquemment étudiées dans des contextes de comportement invasif, de remodelage tissulaire lié à l’inflammation et de phénotypes du développement des organes.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Itga3 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Itga3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Itga3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Integrin α3/ITGA3/CD49c.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Itga3 pour l'étude de la signalisation de Integrin α3/ITGA3/CD49c, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Itga3 essentiels à la fonction de Integrin α3/ITGA3/CD49c
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Itga3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Integrin α3/ITGA3/CD49c plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Integrin α3/ITGA3/CD49c plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Itga3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Integrin α3/ITGA3/CD49c plasmide HDR (m) et le Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Itga3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Itga3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.