Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-421161-KO-2
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Integrin α3/ITGA3/CD49c Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im Integrin α3/ITGA3/CD49c-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Integrin α3/ITGA3/CD49c: sc-374242
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) | sc-421161-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Itga3 kodiert Integrin α3 (ITGA3/CD49c), eine α‑Untereinheit, die sich mit β1 zum lamininbindenden Integrin α3β1 zusammenlagert – einem zentralen Vermittler der Zell–Extrazellulärmatrix-Adhäsion. Über die Signalübertragung an fokalen Adhäsionen beeinflusst ITGA3 die Organisation des Zytoskeletts und aktiviert nachgeschaltete Signalwege wie FAK/Src, PI3K–AKT und MAPK, um Migration, Überleben und epitheliale Morphogenese zu regulieren. In Mausgeweben trägt Integrin α3 zu Interaktionen mit der Basalmembran und zur Architektur der epithelialen Barriere bei und ist damit mit Prozessen wie wundassoziiertem Remodeling und Zellpolarität verknüpft. Eine veränderte ITGA3-Integrin-Signalgebung wird häufig im Kontext invasiven Verhaltens, entzündungsassoziierten Gewebeumbaus und Entwicklungsphänotypen von Organen untersucht.
Das Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Itga3-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Itga3-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Itga3 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Integrin α3/ITGA3/CD49c-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Itga3-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Integrin α3/ITGA3/CD49c-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Itga3-Exone abzielen, die für die Integrin α3/ITGA3/CD49c-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Itga3-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom Integrin α3/ITGA3/CD49c CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Itga3-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Integrin α3/ITGA3/CD49c HDR-Plasmid (m) und Integrin α3/ITGA3/CD49c HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Itga3-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Itga3-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.