Plasmide Double Nickase (h) Integrin β1/ITGB1: sc-400097-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Integrin β1/ITGB1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Integrin β1/ITGB1 Double Nickase (h) et le plasmide Integrin β1/ITGB1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ITGB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Integrin β1/ITGB1 Antibody (A-4): sc-374429
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Integrin β1/ITGB1 | sc-400097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Integrin β1/ITGB1 | sc-400097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGB1 code l’intégrine β1, une sous-unité centrale qui forme des hétérodimères avec de multiples intégrines α pour assurer l’adhésion cellule–matrice extracellulaire et la mécanotransduction. Via son couplage à la kinase d’adhérence focale (FAK), aux kinases de la famille SRC, aux voies PI3K–AKT et MAPK, l’intégrine β1 régule l’organisation du cytosquelette, la polarité, la survie et la migration. Les interactions dépendantes d’ITGB1 avec les laminines, les collagènes et la fibronectine influencent l’intégrité épithéliale, le trafic des cellules immunitaires et le comportement des niches de cellules souches. La dérégulation de la signalisation et du trafic d’ITGB1 est fréquemment étudiée dans des contextes d’invasion et de métastases tumorales, de fibrose et de remodelage tissulaire inflammatoire.
Integrin β1/ITGB1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ITGB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ITGB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ITGB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ITGB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.