Insulin II Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421140-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Insulin IIO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Insulin II (m) e o Plasmídeo Double Nickase Insulin II (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ins2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Insulin II Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421140-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Ins2 de camundongo codifica a Insulina II, um hormônio das células β pancreáticas central para a homeostase da glicose e o metabolismo anabólico. Após a secreção estimulada por glicose, a insulina ativa a sinalização do receptor de insulina para regular as vias PI3K–AKT e MAPK, promovendo a captação de glicose, a síntese de glicogênio, a lipogênese e a supressão da gliconeogênese hepática. O Ins2 também influencia a função e a sobrevivência das células β por meio de respostas ao estresse do retículo endoplasmático (RE) e do processamento da proinsulina na via secretória. A desregulação da produção de insulina ou da sua sinalização está intimamente ligada a fenótipos de doenças metabólicas, tornando o Ins2 um alvo-chave para estudos mecanísticos da regulação da glicose e da biologia das células β.
Insulin II O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ins2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ins2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ins2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ins2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.