Plasmide Double Nickase (h) ING2: sc-404193-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ING2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ING2 Double Nickase (h) et le plasmide ING2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ING2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ING2 Antibody (B-5): sc-271544
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ING2 | sc-404193-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ING2 | sc-404193-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ING2 (inhibitor of growth family member 2) code une protéine suppresseur de tumeur associée à la chromatine, qui agit comme lecteur épigénétique via son doigt PHD, en reconnaissant H3K4me3 afin de coupler les marques d’histones aux conséquences transcriptionnelles. ING2 participe aux réponses aux dommages de l’ADN et au contrôle du cycle cellulaire en modulant des programmes dépendants de p53 et en coopérant avec des complexes d’acétylation/désacétylation des histones qui influencent l’accessibilité de la chromatine. Par ces activités, ING2 affecte des voies régissant l’apoptose, la sénescence et la stabilité du génome. Une expression ou une fonction altérée d’ING2 a été associée à un remodelage de la chromatine dérégulé et a été rapportée dans de multiples contextes liés au cancer, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques du contrôle épigénétique.
ING2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ING2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ING2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ING2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ING2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.