Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plásmido Doble Nickase (h) ING1: sc-402893-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ING1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ING1 (h) y el plásmido de doble nickasa ING1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ING1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: ING1 Anticuerpo (E-10): sc-373817
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ING1 | sc-402893-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ING1 | sc-402893-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ING1 (miembro 1 de la familia inhibidora del crecimiento) codifica una proteína nuclear asociada a la supresión tumoral que actúa como lectora de cromatina mediante su dedo PHD, al reconocer H3K4me3 y coordinar el control transcripcional y epigenético. ING1 integra señales de las vías de daño del ADN y de estrés celular, conectando respuestas dependientes de p53 con la regulación de la progresión del ciclo celular, la apoptosis y la senescencia. Participa en complejos de remodelación de cromatina y de acetilación/desacetilación de histonas, ayudando a configurar programas de expresión génica que mantienen la estabilidad del genoma. Se han descrito alteraciones en la expresión o la función de ING1 en múltiples neoplasias malignas y se estudia en el contexto de una capacidad de reparación del ADN deteriorada y un control del crecimiento desregulado.
ING1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ING1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ING1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ING1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ING1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.