Plasmide Double Nickase (m) IMPACT: sc-421126-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IMPACT correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IMPACT Double Nickase (m) et le plasmide IMPACT Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Impact. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IMPACT | sc-421126-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IMPACT | sc-421126-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IMPACT (imprinted and ancient) code une protéine conservée impliquée dans le contrôle de la traduction et l’adaptation au stress cellulaire, avec des rôles rapportés dans la modulation de nœuds de signalisation qui influencent la synthèse protéique et la croissance. Dans les systèmes murins, IMPACT a été associé à la régulation de voies liées à eIF2α et à des réponses homéostatiques qui couplent l’état nutritionnel au niveau de production traductionnelle. Par ces processus, Impact peut façonner des programmes neuronaux et métaboliques où un contrôle étroit de la protéostasie et des signaux de stress est requis. Le dérèglement de la traduction et des voies de réponse au stress est largement pertinent dans des modèles de neurodéveloppement, de neurodégénérescence et de dysfonctionnement métabolique, faisant d’Impact un locus utile pour des études mécanistiques.
IMPACT Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Impact dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Impact. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Impact. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Impact.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.