Plasmide Double Nickase (h) IMMP1L: sc-414955-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IMMP1L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IMMP1L Double Nickase (h) et le plasmide IMMP1L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IMMP1L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IMMP1L | sc-414955-NIC | 20 µg | $410.00 |
IMMP1L code une sous-unité de peptidase de la membrane interne mitochondriale qui participe à la maturation des protéines mitochondriales importées en clivant les peptides signaux après leur translocation dans la membrane interne. En soutenant le contrôle qualité des protéines mitochondriales et la compétence de la phosphorylation oxydative, IMMP1L contribue au maintien de l’homéostasie bioénergétique et limite les réponses de stress secondaires liées au dysfonctionnement mitochondrial, notamment les altérations de la gestion des espèces réactives de l’oxygène et de la dynamique de la mitophagie. Des études génétiques et fonctionnelles ont associé des variations d’IMMP1L à des phénotypes neurodéveloppementaux et neuropsychiatriques, ce qui concorde avec la forte sensibilité des neurones aux perturbations de la protéostasie mitochondriale. IMMP1L est donc pertinent pour la recherche mécanistique sur les voies de maturation mitochondriale et sur la manière dont l’activité des protéases de la membrane interne façonne le métabolisme cellulaire et l’adaptation au stress.
IMMP1L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IMMP1L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IMMP1L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IMMP1L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IMMP1L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.