Plásmido Doble Nickase (h) IL-8RB: sc-401404-NIC

CXCR2 codifica IL‑8RB, un receptor acoplado a proteína G para quimiocinas CXC ELR+ como CXCL8/IL‑8, que regula la quimiotaxis, la adhesión y la activación de los neutrófilos. La unión del ligando desencadena la señalización canónica de los GPCR a través de Gαi, el flujo de calcio y las vías posteriores PI3K–AKT, MAPK/ERK y PLCβ, integrando señales que moldean el tráfico inflamatorio y las interacciones endoteliales. IL‑8RB está implicado en la regulación de las respuestas inmunitarias innatas, en programas angiogénicos y de cicatrización, y en la comunicación cruzada con redes de citocinas dentro de tejidos inflamados. La señalización de CXCR2 desregulada se estudia con frecuencia en contextos de inflamación crónica e inflamación asociada a tumores, donde el reclutamiento de células mieloides y los gradientes de quimiocinas influyen en la remodelación del microambiente.

IL-8RB El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CXCR2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CXCR2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CXCR2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CXCR2 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.