Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-8RB Double Nickase Plasmid (h): sc-401404-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-8RB Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-8RB Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-8RB Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CXCR2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-8RB: sc-7304
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-8RB Double Nickase Plasmid (h) | sc-401404-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-8RB Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401404-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CXCR2 kodiert IL‑8RB, einen G‑Protein‑gekoppelten Rezeptor für ELR+‑CXC‑Chemokine wie CXCL8/IL‑8, der die Chemotaxis, Adhäsion und Aktivierung von Neutrophilen steuert. Die Ligandenbindung löst eine kanonische GPCR‑Signalübertragung über Gαi, Calciumfluss und nachgeschaltete PI3K‑AKT‑, MAPK/ERK‑ und PLCβ‑Signalwege aus und integriert Signale, die die inflammatorische Zellmigration und Endothelinteraktionen prägen. IL‑8RB ist an der Regulation angeborener Immunantworten, angiogener und wundheilungsbezogener Programme sowie an der Wechselwirkung mit Zytokinnetzwerken in entzündetem Gewebe beteiligt. Eine fehlregulierte CXCR2‑Signalgebung wird häufig in chronisch entzündlichen Kontexten und bei tumorassoziierter Entzündung untersucht, wo myeloide Rekrutierung und Chemokingradienten das Remodeling des Mikromilieus beeinflussen.
IL-8RB Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CXCR2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CXCR2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CXCR2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CXCR2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.