Plasmide Double Nickase (h) IL-6Rα: sc-400582-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-6Rα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-6Rα Double Nickase (h) et le plasmide IL-6Rα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL6R. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-6Rα Antibody (H-7): sc-373708
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-6Rα | sc-400582-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-6Rα | sc-400582-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur alpha de l’interleukine‑6 (IL‑6Rα), codé par le gène IL6R, est la sous-unité du complexe récepteur de l’IL‑6 qui se lie au ligand et initie la signalisation lors de la fixation d’IL‑6 et de l’association avec le co‑récepteur GP130. Cet axe récepteur active la voie JAK/STAT3 ainsi que les voies MAPK et PI3K/AKT, coordonnant les réponses de phase aiguë, la différenciation des leucocytes et, plus largement, des programmes d’expression génique pro‑inflammatoires. IL6R contribue également à la trans‑signalisation de l’IL‑6 via la forme soluble d’IL‑6R, étendant la réponse à des cellules qui expriment principalement GP130. Une signalisation IL6R dérégulée a été impliquée dans l’inflammation chronique et des pathologies à médiation immunitaire, et elle est fréquemment étudiée dans des contextes tels que la biologie des maladies auto‑immunes, l’inflammation associée au cancer et les processus inflammatoires cardiovasculaires.
IL-6Rα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL6R dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL6R. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL6R. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL6R.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.