Plasmide Double Nickase (m) IL-34: sc-429354-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IL-34 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-34 Double Nickase (m) et le plasmide IL-34 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Il34. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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Plasmide Double Nickase (m) IL-34 | sc-429354-NIC | 20 µg | $410.00 |
La protéine codée par le gène murin *Il34* est l’interleukine‑34 (IL‑34), une cytokine qui transmet ses signaux principalement via CSF1R afin de réguler l’engagement de la lignée monocytaire, la survie des macrophages et le développement des microglies. L’IL‑34 influence l’homéostasie des macrophages résidents tissulaires et les réponses inflammatoires en modulant des voies en aval telles que MAPK/ERK, PI3K–AKT et JAK/STAT. Dans le système nerveux comme dans les tissus périphériques, l’IL‑34 contribue au dialogue immuno‑stromal qui façonne l’intégrité des barrières, la phagocytose et la présentation d’antigènes. Une expression dérégulée de l’IL‑34 a été associée à des affections inflammatoires et neuro‑immunes, et elle est fréquemment étudiée dans des modèles d’auto‑immunité, de neuro‑inflammation et de biologie des cellules myéloïdes associées aux tumeurs.
IL-34 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Il34 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Il34. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Il34. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Il34.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.