Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) IL-2Rγ: sc-401876-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IL-2Rγ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IL-2Rγ (h) y el plásmido de doble nickasa IL-2Rγ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IL2RG. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-2Rγ Anticuerpo (A-10): sc-271060
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IL-2Rγ | sc-401876-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IL-2Rγ | sc-401876-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RG codifica la cadena gamma común (IL-2Rγ, CD132), una subunidad esencial de señalización compartida por múltiples receptores de citocinas, incluidos los de IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21. Tras la unión de la citocina, la IL-2Rγ acopla los complejos receptores a JAK3 y a la señalización posterior mediada por STAT, coordinando el desarrollo, la supervivencia y la diferenciación efectora de los linfocitos en células T, células B y células NK. Este eje se integra con programas más amplios de regulación inmunitaria, como la proliferación y la diferenciación impulsadas por citocinas, y el mantenimiento homeostático. La alteración de la señalización dependiente de IL2RG se asocia estrechamente con defectos graves en la función de las células inmunitarias adaptativas e innatas, lo que convierte a IL2RG en un gen clave para estudios mecanísticos de inmunodeficiencia y de señalización de receptores de citocinas.
IL-2Rγ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IL2RG en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IL2RG. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IL2RG. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IL2RG alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.