Plasmide Double Nickase (h) IL-2Rα: sc-401262-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-2Rα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-2Rα Double Nickase (h) et le plasmide IL-2Rα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL2RA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-2Rα Antibody (C-9): sc-393326
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-2Rα | sc-401262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-2Rα | sc-401262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RA code la chaîne alpha du récepteur de l’interleukine-2 (IL‑2Rα, CD25), un composant à haute affinité du complexe récepteur de l’IL‑2 qui s’associe à IL2RB et IL2RG pour assurer la détection de l’IL‑2. L’engagement des récepteurs contenant IL‑2Rα favorise une signalisation STAT5 dépendante de JAK1/JAK3 ainsi que des programmes transcriptionnels plus larges qui régulent la prolifération, la survie et la différenciation des cellules T, avec une importance particulière pour le maintien des cellules T régulatrices et l’homéostasie immunitaire. L’expression de CD25 est régulée de façon dynamique lors de l’activation des lymphocytes et contribue à ajuster la réactivité aux cytokines au sein de l’axe IL‑2/STAT. Une signalisation ou une expression d’IL2RA dérégulée a été associée à des pathologies d’origine immunitaire et à des états fonctionnels altérés des cellules T, ce qui en fait une cible fréquente des études mécanistiques en immunologie.
IL-2Rα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL2RA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL2RA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL2RA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL2RA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.