Plasmide Double Nickase (m2) Il-28a: sc-437298-NIC-2
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m2) Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid Double Nickase (m2) et le plasmide Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid Double Nickase (m22) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ifnl2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m2) Il-28a | sc-437298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Gbp2b code une protéine de la famille des protéines liant le guanylate, impliquée dans l’immunité intrinsèque cellulaire induite par les interférons, où elle contribue à la restriction antimicrobienne et à la coordination de la signalisation immunitaire innée en aval des programmes JAK–STAT et des gènes stimulés par les interférons. La protéine Il-28a (également appelée IFN-λ2) est un interféron de type III qui transmet son signal via le complexe récepteur IFNLR1/IL10RB afin d’activer des réponses transcriptionnelles STAT1/STAT2–IRF9 (ISGF3), façonnant les défenses antivirales épithéliales et muqueuses et modulant les réseaux de cytokines inflammatoires. La dérégulation de ces voies est pertinente pour l’étude de la sensibilité aux infections virales, de l’immunité des barrières et de phénotypes inflammatoires chroniques, notamment au niveau des voies aériennes et du tube digestif. L’édition génétique de Gbp2b ou d’Il-28a dans des modèles murins permet d’analyser les mécanismes de l’interaction et du dialogue entre interférons, des interactions hôte–pathogène et des programmes transcriptionnels en aval, au moyen d’épreuves d’infection, de transcriptomique et de profilage des cellules immunitaires.
Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid Le plasmide double nickase (m2) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ifnl2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ifnl2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ifnl2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ifnl2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.