IL-1Rrp2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406998
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IL-1Rrp2 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IL-1Rrp2, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IL-1Rrp2 Anticuerpo (5G5): sc-293377
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IL-1Rrp2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406998 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
IL1RL2 codifica IL-1Rrp2, un miembro de la familia de receptores de interleucina-1 que participa en la señalización inmunitaria innata y de las mucosas. Como receptor de las citocinas IL-36, IL-1Rrp2 recluta la proteína accesoria del receptor de IL-1 para impulsar una señalización dependiente de MyD88, activando las vías de NF-κB y MAPK que regulan la expresión génica inflamatoria y las respuestas de la barrera epitelial. IL1RL2 se expresa en compartimentos inmunitarios y epiteliales y se estudia con frecuencia en el contexto de la inflamación inducida por citocinas, incluidos procesos inflamatorios de la piel y de las vías respiratorias. La desregulación de la señalización IL-36–IL-1Rrp2 se ha asociado con fenotipos inflamatorios, lo que convierte a esta diana en relevante para estudios mecanísticos de redes de citocinas e inflamación tisular.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IL-1Rrp2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen IL1RL2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del IL1RL2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de IL1RL2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IL-1Rrp2.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en IL1RL2 para la investigación de la señalización de IL-1Rrp2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de IL1RL2 críticos para la función de IL-1Rrp2
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de IL1RL2 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IL-1Rrp2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IL-1Rrp2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus IL1RL2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IL-1Rrp2 (h) y el plásmido HDR IL-1Rrp2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología IL1RL2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana IL1RL2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.