Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IL-1RAcP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421101
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-1RAcP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-1RAcP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-1RAcP Anticorpo (D-5): sc-376872
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-1RAcP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421101 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Il1rap codifica a IL-1RAcP, um co-receptor essencial que forma complexos com membros da família de receptores de IL-1 para propagar sinais iniciados por IL-1α/IL-1β e ligantes relacionados. Após o engajamento do receptor, a IL-1RAcP favorece a montagem de complexos de sinalização dependentes de MyD88 que ativam cascatas IRAK–TRAF6, levando à ativação das vias NF-κB e MAPK e a programas transcricionais a jusante que controlam a inflamação, as respostas imunes inatas e a comunicação entre estroma e sistema imune. Em modelos murinos, alterações na sinalização IL-1R/IL-1RAcP são frequentemente usadas para estudar mecanismos que impulsionam estados inflamatórios crônicos, respostas a lesão tecidual e remodelamento amplificado por citocinas em diversos sistemas de órgãos. Como a IL-1RAcP integra múltiplas entradas da família IL-1, ela é relevante para dissecar o crosstalk entre vias que molda o recrutamento de leucócitos, a função de barreira e a expressão de genes inflamatórios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-1RAcP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il1rap em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il1rap, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il1rap na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-1RAcP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il1rap para a investigação da sinalização de IL-1RAcP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il1rap críticos para a função IL-1RAcP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il1rap para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-1RAcP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-1RAcP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il1rap. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-1RAcP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-1RAcP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il1rap para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il1rap definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.