Plasmide Double Nickase (m) IL-17R: sc-421093-NIC

Le gène murin **Il17ra** code **IL-17R**, une sous-unité de récepteur transmembranaire de type I qui se lie aux cytokines de la famille IL‑17 afin d’initier une signalisation pro‑inflammatoire dans les compartiments épithéliaux et stromaux ainsi que dans les lignées myéloïdes. La liaison du ligand favorise le recrutement de l’adaptateur **ACT1** et l’activation en aval des voies **NF‑κB**, **MAPK** et **C/EBP**, déclenchant des programmes de chimiokines et de cytokines qui coordonnent la mobilisation des neutrophiles et l’immunité de barrière. La signalisation via IL‑17R s’articule avec les réponses immunitaires pilotées par les **Th17** et contribue à l’inflammation et au remodelage tissulaires dans des modèles de maladies auto‑immunes et inflammatoires, notamment l’arthrite, la dermatite et l’inflammation des voies aériennes. L’analyse de la fonction de **Il17ra** est donc importante pour étudier les mécanismes de défense de l’hôte dépendants des cytokines et la régulation des réseaux inflammatoires dans les systèmes murins.

IL-17R Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Il17ra dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Il17ra. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Il17ra. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Il17ra.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.