Particules Lentivirales d'Activation (m) IL-15: sc-421089-LAC

Le gène murin *Il15* code l’interleukine-15 (IL-15), une cytokine pléiotrope qui soutient le développement, la survie et l’activation des cellules NK et des lymphocytes T CD8+ mémoire via une transp présentation médiée par IL‑15Rα vers les complexes récepteurs IL‑2/15Rβ et la chaîne γ commune. La signalisation en aval mobilise principalement la voie JAK1/JAK3–STAT5, avec des contributions supplémentaires des voies PI3K–AKT–mTOR et MAPK, qui façonnent la prolifération des lymphocytes, leur fonction cytotoxique et leur aptitude métabolique. L’IL‑15 influence également l’activation des cellules myéloïdes et les réseaux de cytokines au sein des tissus inflammés, faisant le lien entre les réponses immunitaires innée et adaptative. Une expression et une signalisation dérégulées de l’IL‑15 sont largement étudiées dans les contextes d’inflammation chronique, d’auto-immunité, d’infection et d’immunologie tumorale, en tant que moteur de modifications de la composition des cellules immunitaires et de leur état d’activation.

Les particules d'activation lentivirales IL-15 (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Il15 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales IL-15 (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Il15, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de IL-15. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Il15 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.