Partículas Lentivirales de Activación (h2) IL-13Rα2: sc-402525-LAC-2

El IL13RA2 humano codifica el receptor alfa 2 de la interleucina 13 (IL‑13Rα2), un receptor de alta afinidad para IL‑13 que modula la señalización de citocinas de tipo 2 y puede actuar como un receptor señuelo regulador que influye en la disponibilidad de IL‑13 y en programas transcripcionales posteriores dependientes de STAT6. La expresión de IL‑13Rα2 se asocia con procesos que incluyen interacciones epitelio‑mesénquima, remodelación de la matriz extracelular y respuestas inflamatorias, con comunicación cruzada con vías que regulan la migración celular y la fibrosis tisular. La desregulación de IL13RA2 se relaciona con frecuencia con la biología tumoral y con fenotipos del microambiente inmunitario, y se ha estudiado en cánceres como el glioblastoma, así como en contextos de fibrosis e inflamación alérgica. La edición genética de IL13RA2 facilita estudios mecanísticos de la dinámica de la señalización de IL‑13, de las interacciones receptor‑ligando y de cribados de genómica funcional que evalúan fenotipos impulsados por citocinas en modelos celulares humanos relevantes.

Las partículas de activación lentiviral IL-13Rα2 (h2) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de IL13RA2 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral IL-13Rα2 (h2) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción IL13RA2, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de IL-13Rα2. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo IL13RA2 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.