Plasmide Double Nickase (h) IL-13Rα2: sc-402525-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-13Rα2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-13Rα2 Double Nickase (h) et le plasmide IL-13Rα2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL13RA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-13Rα2 Antibody (2K8): sc-134363
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-13Rα2 | sc-402525-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-13Rα2 | sc-402525-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **IL13RA2** code **IL-13Rα2**, une chaîne de liaison à l’IL-13 à haute affinité qui module la signalisation des cytokines de type 2 et peut façonner les programmes transcriptionnels en aval associés à **JAK/STAT6** en agissant comme composant régulateur du récepteur. En contrôlant la disponibilité de l’IL-13 et la dynamique des complexes récepteurs, IL-13Rα2 influence les réponses des cellules épithéliales et stromales liées à l’inflammation, au remodelage tissulaire et à la régulation de la matrice extracellulaire. Une expression altérée d’**IL13RA2** a été rapportée dans des contextes de microenvironnements inflammatoires chroniques ainsi que dans de nombreux types de tumeurs, où des voies sensibles à l’IL-13 affectent la migration cellulaire, l’invasion et les interactions immunitaires. Ces caractéristiques font d’**IL13RA2** une cible utile pour étudier la biologie des récepteurs aux cytokines, le trafic des récepteurs et les phénotypes de signalisation induits par le microenvironnement dans des modèles de cellules humaines.
IL-13Rα2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL13RA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL13RA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL13RA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL13RA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.