IL-13Rα1 Plasmide Double Nickase (h): sc-405042-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-13Rα1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-13Rα1 Double Nickase Plasmid (h) e il IL-13Rα1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IL13RA1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-13Rα1 Antibody (D-2): sc-398831
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-13Rα1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405042-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-13Rα1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405042-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL13RA1 codifica il recettore umano dell’interleuchina-13 alfa 1 (IL-13Rα1), una subunità recettoriale per citochine di tipo I che si associa a IL4RA per formare un recettore funzionale per l’IL-13 e contribuire alla segnalazione dell’IL-4. Il legame del ligando attiva le vie JAK/STAT, in particolare STAT6, innescando programmi trascrizionali coinvolti nella regolazione della barriera epiteliale, nella produzione di muco, nella polarizzazione dei macrofagi e nel class switching delle cellule B. La segnalazione dipendente da IL-13Rα1 è centrale nell’infiammazione di tipo 2 ed è spesso studiata nella biologia delle vie aeree e della cute, inclusi modelli di asma, infiammazione allergica e dermatite atopica. Alterazioni dell’espressione di IL13RA1 o delle dinamiche di segnalazione sono inoltre oggetto di studio nelle interazioni immunità–tumore e nei contesti di rimodellamento fibrotico, in cui i programmi IL-13–STAT6 possono plasmare i fenotipi stromali e mieloidi.
IL-13Rα1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IL13RA1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IL13RA1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IL13RA1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IL13RA1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.