Plasmide Double Nickase (h) IL-10Rα: sc-402486-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-10Rα correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-10Rα Double Nickase (h) et le plasmide IL-10Rα Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL10RA. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-10Rα Antibody (A-3): sc-365374
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-10Rα | sc-402486-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-10Rα | sc-402486-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL10RA code la chaîne alpha du récepteur de l’interleukine-10 (IL-10Rα), un composant de liaison à haute affinité indispensable à la signalisation anti-inflammatoire dépendante de l’IL-10. Après liaison du ligand, IL-10Rα s’associe à IL10RB pour activer JAK1/TYK2 et les programmes transcriptionnels en aval de STAT3, qui limitent la production de cytokines pro-inflammatoires et modulent la fonction des cellules présentatrices d’antigène. Cette voie contribue à l’homéostasie immunitaire myéloïde et lymphoïde aux sites muqueux et systémiques, en influençant la polarisation des macrophages, la maturation des cellules dendritiques et les réponses des lymphocytes T. Des perturbations génétiques ou fonctionnelles d’IL10RA sont associées à une dérégulation immunitaire et à des phénotypes de maladies inflammatoires, ce qui souligne sa pertinence dans les études de la signalisation des cytokines, des interactions hôte–microbiome et de l’immunité des barrières.
IL-10Rα Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL10RA dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL10RA. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL10RA. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL10RA.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.