Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) IL-1α: sc-421096-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IL-1α correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-1α Double Nickase (m) et le plasmide IL-1α Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Il1a. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-1α Antibody (ALF-161): sc-12741
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IL-1α | sc-421096-NIC | 20 µg | $410.00 |
Il1a chez la souris code l’interleukine‑1 alpha (IL‑1α), une cytokine pro‑inflammatoire de réponse précoce produite par les cellules épithéliales, les lignées myéloïdes et d’autres types cellulaires soumis à un stress. L’IL‑1α signale principalement via le récepteur de l’IL‑1 de type 1 (IL‑1R1) et la cascade dépendante de MyD88, activant les voies NF‑κB et MAPK et induisant des programmes transcriptionnels qui régulent le recrutement des leucocytes, l’activation endothéliale et les réponses de phase aiguë. Au‑delà de la signalisation via sa forme sécrétée, l’IL‑1α peut agir comme une alar mine libérée lors de dommages cellulaires, reliant l’inflammation stérile à l’activation de l’immunité innée. Une activité déréglée de l’IL‑1α est impliquée dans le remodelage tissulaire inflammatoire et des pathologies immunitaires, ce qui justifie son utilisation dans des modèles d’auto‑immunité, de dermatite, d’inflammation de type arthritique et d’inflammation associée aux tumeurs.
IL-1α Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Il1a dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Il1a. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Il1a. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Il1a.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.