IGSF4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405765

Visão geral

CADM3 (também conhecido como IGSF4B) codifica uma molécula de adesão celular da superfamília das imunoglobulinas que sustenta contactos célula–célula independentes de cálcio e contribui para a organização de microdomínios de membrana em locais de junções intercelulares. Por meio de sinalização dependente de adesão, o CADM3 pode influenciar o crescimento de neuritos, a conectividade sináptica e a arquitetura de tecidos epiteliais/neurais, ligando-se assim a vias que regulam a polaridade celular e o controlo do crescimento mediado por contacto. Alterações na expressão ou regulação de CADM3 têm sido relatadas em estudos de processos do neurodesenvolvimento e em biologia do cancro, nos quais mudanças nos programas de adesão podem afetar a invasão, a diferenciação e o comportamento metastático. Como fator de adesão associado à superfície, o IGSF4B é, portanto, relevante para investigar como complexos juncionais e a sinalização de adesão remodelam a comunicação celular e a organização tecidular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IGSF4B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CADM3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CADM3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CADM3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IGSF4B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CADM3 para a investigação da sinalização de IGSF4B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CADM3 críticos para a função IGSF4B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CADM3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IGSF4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IGSF4B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CADM3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IGSF4B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IGSF4B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CADM3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CADM3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.