Plasmide Double Nickase (h) IGFBP6: sc-404768-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IGFBP6 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IGFBP6 Double Nickase (h) et le plasmide IGFBP6 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IGFBP6. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IGFBP6 Antibody (1A8): sc-293295
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IGFBP6 | sc-404768-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IGFBP6 | sc-404768-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP6 code la protéine 6 de liaison aux facteurs de croissance de type insuline (insulin-like growth factor binding protein 6), un régulateur sécrété présentant une forte affinité pour l’IGF‑II et modulant la biodisponibilité des IGF ainsi que la signalisation en aval dépendante d’IGF1R. En tamponnant l’IGF‑II extracellulaire, IGFBP6 influence l’activité des voies PI3K–AKT et MAPK, ce qui affecte les programmes de prolifération, de survie et de différenciation cellulaires. IGFBP6 a également été associé à la migration et aux interactions avec la matrice extracellulaire, soutenant des rôles dans le remodelage tissulaire et le dialogue entre la cellule et son microenvironnement. Une expression altérée d’IGFBP6 a été rapportée dans de multiples contextes de recherche sur le cancer et le métabolisme, ce qui en fait un nœud pertinent pour étudier la dérégulation de l’axe IGF et les phénotypes dépendants des facteurs de croissance.
IGFBP6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IGFBP6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IGFBP6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IGFBP6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IGFBP6.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.