IGFBP6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421067

Descripción general

Igfbp6 codifica la proteína 6 de unión a factores de crecimiento similares a la insulina (IGFBP6), un regulador secretado de la señalización de los factores de crecimiento similares a la insulina con alta afinidad por IGF‑II, que modula la biodisponibilidad del ligando y la activación del receptor. Al secuestrar IGF‑II e influir en su distribución en el espacio extracelular, IGFBP6 puede modular la salida de las vías PI3K–AKT y MAPK, afectando así la proliferación, la diferenciación, la supervivencia y la adaptación metabólica. En tejidos de ratón, la expresión de Igfbp6 contribuye a programas de desarrollo y de homeostasis tisular, y la actividad alterada de IGFBP6 se ha estudiado en contextos en los que se implica la desregulación del eje IGF, incluida la biología del cáncer y fenotipos cardiometabólicos. Su localización extracelular también la hace relevante para estudios de comunicación paracrina y del control del microambiente sobre la señalización de factores de crecimiento.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IGFBP6 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Igfbp6 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Igfbp6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Igfbp6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IGFBP6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Igfbp6 para la investigación de la señalización de IGFBP6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Igfbp6 críticos para la función de IGFBP6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Igfbp6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IGFBP6 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IGFBP6 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Igfbp6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IGFBP6 (m) y el plásmido HDR IGFBP6 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Igfbp6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Igfbp6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.