IGFBP2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421063

Übersicht

Igfbp2 kodiert das insulinähnliche Wachstumsfaktor-Bindungsprotein 2 (IGFBP2), einen sezernierten Modulator der Bioverfügbarkeit von IGF‑I/IGF‑II, der die IGF‑Rezeptor-Signalübertragung sowie nachgeschaltete PI3K–AKT- und MAPK-Signalwege fein abstimmt. Durch die Regulation von Bindung (Sequestrierung) und Präsentation von Wachstumsfaktoren beeinflusst IGFBP2 während Entwicklung und Gewebeumbau Zellproliferation, Überleben, Migration und Interaktionen mit der extrazellulären Matrix. In Mausmodellen wurde eine veränderte Igfbp2-Expression mit Stoffwechselregulation, Fettgewebsbiologie sowie neuroinflammatorischen oder verletzungsassoziierten Reaktionen in Verbindung gebracht, was Igfbp2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für Signalweg-Studien macht. Seine kontextabhängigen Rollen in onkogener Signalgebung und im Remodeling der Mikroumgebung unterstützen zudem mechanistische Untersuchungen in krebsrelevanten Modellen, ohne klinische Ergebnisse zu implizieren.

Das IGFBP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Igfbp2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Igfbp2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Igfbp2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IGFBP2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Igfbp2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IGFBP2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Igfbp2-Exone abzielen, die für die IGFBP2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Igfbp2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IGFBP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IGFBP2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Igfbp2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IGFBP2 HDR-Plasmid (m) und IGFBP2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Igfbp2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Igfbp2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.