IGF2BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-435664

概要

Igf2bp2 は、N6-メチルアデノシン（m6A）修飾を受けた転写産物を認識し、mRNA の安定性、局在、翻訳を調節する RNA 結合タンパク質 IGF2BP2 をコードします。遺伝子発現の転写後制御を通じて、IGF2BP2 はインスリン/IGF および PI3K–AKT 経路を含む代謝シグナル伝達ネットワークに影響を与え、細胞増殖、エネルギー恒常性、ストレス応答を左右します。マウスモデルおよびヒト遺伝学の知見から、IGF2BP2 活性の変化はインスリン抵抗性や2型糖尿病の感受性といった代謝表現型と関連しており、さらに増殖や炎症に関わる状況でも発現の破綻が報告されています。これらの特性により、IGF2BP2 は、代謝や疾患に関連する細胞状態における RNA の運命決定や m6A 依存的制御を研究する上で有用な結節点となります。

IGF2BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIgf2bp2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Igf2bp2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Igf2bp2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IGF2BP2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IGF2BP2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Igf2bp2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IGF2BP2の機能に不可欠なIgf2bp2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Igf2bp2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IGF2BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIGF2BP2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igf2bp2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IGF2BP2 HDRプラスミド（m）および IGF2BP2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIgf2bp2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIgf2bp2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。