Plasmide Double Nickase (h) IGF-II: sc-401015-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IGF-II correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IGF-II Double Nickase (h) et le plasmide IGF-II Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IGF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IGF-II Antibody (H-11): sc-515805
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IGF-II | sc-401015-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IGF-II | sc-401015-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’IGF2 humain code le facteur de croissance de type insuline II (IGF‑II), un facteur de croissance sécrété qui signale principalement via IGF1R et l’isoforme A du récepteur de l’insuline, afin de réguler la prolifération, la survie, le métabolisme et la différenciation. IGF‑II active les cascades PI3K–AKT–mTOR et RAS–RAF–MEK–ERK, influençant la progression du cycle cellulaire et la signalisation anabolique dans des contextes de développement et d’homéostasie tissulaire. IGF2 est soumis à l’empreinte génomique et à une régulation épigénétique, et la dérégulation de l’expression ou de la signalisation d’IGF‑II est associée à une altération du contrôle de la croissance et à des phénotypes oncogènes dans de nombreux types de tumeurs. Ces propriétés font d’IGF2 un nœud largement utilisé pour disséquer la signalisation des facteurs de croissance, la régulation du développement et les réponses mitogènes dépendantes du contexte.
IGF-II Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IGF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IGF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IGF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IGF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.