Particules Lentivirales d'Activation (h) IGF-1 Receptor α/β/IGF1R: sc-400084-LAC

IGF1R code pour le récepteur du facteur de croissance de type insulinique 1 (récepteur IGF‑1 α/β), une tyrosine kinase membranaire qui se lie à IGF‑1/IGF‑2 pour réguler la croissance cellulaire, la survie et le métabolisme. L’autophosphorylation induite par le ligand active les voies de signalisation PI3K–AKT–mTOR et RAS–RAF–MEK–ERK en aval, intégrant des signaux mitogènes et anti‑apoptotiques aux besoins bioénergétiques cellulaires. La signalisation d’IGF1R influence la différenciation, la progression du cycle cellulaire et les réponses au stress via des protéines adaptatrices telles que IRS1/2 et SHC. Une activité d’IGF1R dérégulée est associée à une signalisation proliférative aberrante et à des programmes métaboliques altérés, observés dans divers contextes de recherche en oncologie et en maladies métaboliques.

Les particules d'activation lentivirales IGF-1 Receptor α/β/IGF1R (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de IGF1R dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales IGF-1 Receptor α/β/IGF1R (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription IGF1R, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de IGF-1 Receptor α/β/IGF1R. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif IGF1R ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.