Plasmide Double Nickase (h) IFRD1: sc-405862-NIC

Le régulateur du développement lié à l’interféron 1 (IFRD1) est un co‑régulateur transcriptionnel qui module des programmes d’expression génique associés à la différenciation cellulaire, aux réponses au stress et à la signalisation inflammatoire. IFRD1 peut influencer le contrôle des cibles en aval dépendant de la chromatine et des facteurs de transcription, contribuant ainsi à la régulation de la fonction des cellules myéloïdes et des réponses transcriptionnelles induites par des stimuli. Dans les cellules humaines, IFRD1 a été étudié dans des contextes de régulation immunitaire et d’homéostasie tissulaire, où une expression altérée peut affecter des voies gouvernant des réseaux de gènes sensibles aux cytokines et la maturation cellulaire. Ces propriétés font d’IFRD1 un nœud pertinent pour l’analyse mécanistique du contrôle transcriptionnel au cours de processus associés à l’inflammation et d’états de différenciation.

IFRD1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IFRD1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IFRD1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IFRD1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IFRD1.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.