Plasmide Double Nickase (h) IFN-γRβ: sc-402794-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IFN-γRβ correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFN-γRβ Double Nickase (h) et le plasmide IFN-γRβ Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IFNGR2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IFN-γRβ Antibody (A-11): sc-377291
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IFN-γRβ | sc-402794-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IFN-γRβ | sc-402794-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le récepteur 2 de l’interféron gamma (IFNGR2) code IFN‑γRβ, la sous-unité accessoire de signalisation du complexe récepteur de l’interféron de type II, qui s’associe à IFNGR1 pour médiatiser les réponses cellulaires à l’interféron‑γ. Lors de la liaison du ligand, IFN‑γRβ favorise l’activation de l’axe JAK1/JAK2–STAT1, stimulant des programmes transcriptionnels dépendants de STAT1 qui modulent la présentation de l’antigène, l’activation des macrophages et l’immunité antimicrobienne. La fonction d’IFNGR2 influence le dialogue avec des voies inflammatoires et immunorégulatrices plus larges, notamment les réseaux de gènes stimulés par l’interféron et les circuits de signalisation des cytokines. Des perturbations génétiques ou fonctionnelles d’IFNGR2 sont associées à une diminution de la réponse à l’IFN‑γ et à une susceptibilité accrue aux infections sévères, ce qui en fait une cible clé pour l’étude des mécanismes de défense de l’hôte et des dérégulations immunitaires.
IFN-γRβ Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IFNGR2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IFNGR2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IFNGR2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IFNGR2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.