Plásmido Doble Nickase (m) IFN-α/βRα: sc-421047-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IFN-α/βRα consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFN-α/βRα (m) y el plásmido de doble nickasa IFN-α/βRα (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ifnar1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IFN-α/βRα Anticuerpo (E-12): sc-393089
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IFN-α/βRα | sc-421047-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IFN-α/βRα | sc-421047-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifnar1 de ratón codifica la subunidad alfa del receptor de interferón alfa/beta (IFN-α/βRα), un componente central del complejo receptor de interferón de tipo I que inicia señales antivirales e inmunomoduladoras tras la unión de IFN-α/β. La activación del receptor pone en marcha JAK1 y TYK2, promoviendo la fosforilación de STAT1/STAT2, el ensamblaje de ISGF3 con IRF9 y la transcripción de genes estimulados por interferón que regulan la activación de la inmunidad innata, la presentación de antígenos y la supervivencia celular. La señalización de IFNAR1 también se interrelaciona con las vías de NF-κB y MAPK para modular las respuestas inflamatorias y el diálogo con las respuestas de los receptores de reconocimiento de patrones. Los programas dependientes de IFNAR1 desregulados se estudian con frecuencia en contextos de susceptibilidad viral, inflamación crónica y desregulación inmunitaria asociada a autoinmunidad, así como en las interacciones entre tumor e inmunidad.
IFN-α/βRα El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ifnar1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ifnar1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ifnar1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ifnar1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.