Plasmide Double Nickase (m) IFIT1: sc-421035-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) IFIT1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFIT1 Double Nickase (m) et le plasmide IFIT1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Ifit1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) IFIT1 | sc-421035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) IFIT1 | sc-421035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La protéine induite par l’interféron contenant des répétitions tétratricopeptidiques 1 (IFIT1), codée chez la souris par Ifit1, est un effecteur majeur stimulé par l’interféron qui restreint la réplication virale en reconnaissant des caractéristiques d’ARN non-soi, telles qu’un coiffage incorrect ou un ARN portant un triphosphate en 5′, et en limitant l’initiation de la traduction. IFIT1 agit au sein des voies de signalisation de l’immunité innée en aval de l’interféron de type I et des voies des récepteurs de reconnaissance des motifs, notamment les récepteurs de type RIG-I et les réponses antivirales dépendantes des TLR, façonnant le paysage transcriptionnel et traductionnel lors de l’infection et de l’inflammation. Des modifications de l’expression de Ifit1 et de l’activité de la famille IFIT ont été associées à des signatures d’interféron dérégulées, à la susceptibilité de l’hôte aux agents pathogènes viraux et à des pathologies à médiation immunitaire, ce qui en fait un nœud utile pour disséquer, dans des modèles murins, les programmes géniques dépendants de l’interféron. Les chercheurs étudient couramment IFIT1 dans des contextes tels que les réponses au stress induites par les cytokines, l’activation des macrophages et des cellules dendritiques, ainsi que la modulation de la présentation de l’antigène et de la communication intercellulaire au sein du système immunitaire.
IFIT1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Ifit1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Ifit1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Ifit1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Ifit1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.