Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) ICSBP: sc-400774-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ICSBP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ICSBP Double Nickase (h) et le plasmide ICSBP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IRF8. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ICSBP Antibody (E-9): sc-365042
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ICSBP | sc-400774-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) ICSBP | sc-400774-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le facteur régulateur de l’interféron 8 (IRF8), également connu sous le nom d’ICSBP, est un facteur de transcription hématopoïétique qui gouverne l’engagement de lignée et la maturation des populations de cellules myéloïdes et dendritiques. Il intègre les signaux des interférons et des récepteurs de type Toll en s’associant à des facteurs des familles ETS/IRF afin de moduler des promoteurs contenant des éléments ISRE/EICE, façonnant ainsi les programmes de cytokines, la présentation de l’antigène et les fonctions effectrices de l’immunité innée. Les réseaux transcriptionnels dépendants d’IRF8 influencent la polarisation des macrophages, le développement des cellules dendritiques et l’expression de gènes inflammatoires, ce qui le relie aux voies contrôlant les réponses antimicrobiennes et l’homéostasie immunitaire. Une activité d’IRF8 dérégulée a été associée à une myélopoïèse altérée et à des dysfonctionnements immunitaires, et IRF8 est fréquemment étudié dans le contexte de la leucémogenèse, des syndromes myélodysplasiques et des troubles inflammatoires.
ICSBP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IRF8 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IRF8. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IRF8. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IRF8.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.