Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO ICSBP (m): sc-421016
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ICSBP Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ICSBP, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ICSBP Antibody (E-9): sc-365042
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ICSBP (m) | sc-421016 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Le gène murin *Irf8* code le facteur de transcription ICSBP (interferon consensus sequence-binding protein), un régulateur des lignées hématopoïétiques qui coordonne la différenciation et la maturation fonctionnelle des cellules myéloïdes et dendritiques. ICSBP intègre des programmes transcriptionnels induits par les interférons aux signaux de l’immunité innée afin de moduler la présentation de l’antigène, les réponses en cytokines inflammatoires et la défense antimicrobienne, et il interagit avec des voies contrôlant le développement des phagocytes mononucléés et l’homéostasie immunitaire. Une activité IRF8/ICSBP altérée est associée à une myélopoïèse dérégulée, à une fonction dendritique déficiente et à des états inflammatoires aberrants, ce qui en fait une cible largement utilisée pour des études mécanistiques du développement immunitaire et de la réponse de l’hôte.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ICSBP (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Irf8 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Irf8, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Irf8 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ICSBP.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Irf8 pour l'étude de la signalisation de ICSBP, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Irf8 essentiels à la fonction de ICSBP
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Irf8 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ICSBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ICSBP plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Irf8. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ICSBP plasmide HDR (m) et le ICSBP (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Irf8 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Irf8 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.