ICAM-1/CD54 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400098-LAC

Interzelluläres Adhäsionsmolekül 1 (ICAM1), auch bekannt als ICAM-1/CD54, ist ein Zelloberflächen-Glykoprotein der Immunglobulin-Superfamilie, das durch Bindung an Integrine wie LFA-1 (ITGAL/ITGB2) und Mac-1 (ITGAM/ITGB2) die feste Adhäsion von Leukozyten und deren Transmigration vermittelt. Seine Expression wird stark durch inflammatorische Zytokine und Pattern-Recognition-Signalwege induziert und integriert Signale aus den NF-κB- und MAPK-Signalwegen, um die endotheliale Aktivierung und den Traffic von Immunzellen zu regulieren. ICAM-1 ist zudem an der Umgestaltung des Zytoskeletts und an Outside-in-Signalen beteiligt, die die Barrierefunktion und Zell-Zell-Interaktionen beeinflussen können. Eine fehlregulierte ICAM1-Expression ist mit chronischer Entzündung, vaskulärer Pathologie, autoimmunen Phänotypen und der Dynamik des tumorassoziierten Immunmikromilieus verbunden und macht ICAM1 zu einem nützlichen Knotenpunkt für mechanistische Studien der Entzündungs- und Adhäsionsbiologie.

ICAM-1/CD54 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ICAM1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ICAM-1/CD54 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ICAM1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ICAM-1/CD54-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ICAM1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.