Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Iba1 Plasmide Double Nickase (h): sc-400513-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Iba1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Iba1 Double Nickase Plasmid (h) e il Iba1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira AIF1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Iba1 Antibody (1022-5): sc-32725
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Iba1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400513-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Iba1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400513-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AIF1 codifica l'allograft inflammatory factor 1 (Iba1), una proteina legante il Ca2+ associata all'actina, arricchita nelle cellule della linea mieloide, che supporta l'increspamento della membrana, la fagocitosi e la motilità. Iba1 contribuisce al rimodellamento del citoscheletro e a programmi di segnalazione infiammatoria legati all'attivazione dell'immunità innata, incluse le risposte di microglia e macrofagi. Un'alterazione dell'espressione di AIF1/Iba1 è spesso utilizzata come indicatore di stati mieloidi attivati nella neuroinfiammazione e in quadri più ampi di disregolazione immunitaria. AIF1 umano è quindi rilevante per lo studio delle transizioni di stato cellulare che accoppiano la dinamica del citoscheletro con la produzione di citochine e la gestione degli antigeni.
Iba1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus AIF1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di AIF1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di AIF1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con AIF1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.