Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Iba1 (m): sc-419058
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Iba1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Iba1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Iba1 Antibody (1022-5): sc-32725
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Iba1 (m) | sc-419058 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Aif1 code pour la molécule adaptatrice 1 se liant au calcium ionisé (Iba1), une protéine cytosolique à motif EF-hand fortement enrichie dans la microglie et d’autres cellules de la lignée myéloïde. Iba1 participe au remodelage du cytosquelette d’actine, à la formation de replis membranaires (membrane ruffling) et à la phagocytose, soutenant la surveillance immunitaire innée et les programmes de signalisation inflammatoire dans le système nerveux central. Par des interactions qui influencent la motilité dépendante de Rac/Rho et les réponses aux dynamiques du calcium, Iba1 contribue aux états d’activation microgliale et aux réponses aux lésions tissulaires. Une expression altérée de Aif1/Iba1 est largement utilisée comme marqueur de neuroinflammation et a été associée à des phénotypes microgliaux pathologiques dans des modèles de maladies neurodégénératives et neuro-immunes.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Iba1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Aif1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Aif1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Aif1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Iba1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Aif1 pour l'étude de la signalisation de Iba1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Aif1 essentiels à la fonction de Iba1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Aif1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Iba1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Iba1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Aif1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Iba1 plasmide HDR (m) et le Iba1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Aif1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Aif1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.