Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Iba1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-419058
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Iba1 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Iba1, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Iba1 Antibody (1022-5): sc-32725
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Iba1 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-419058 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Aif1 codifica la ionized calcium-binding adapter molecule 1 (Iba1), una proteina citosolica con motivo EF-hand altamente arricchita nelle microglia e in altre cellule della linea mieloide. Iba1 partecipa al rimodellamento del citoscheletro di actina, al ruffling di membrana e alla fagocitosi, sostenendo la sorveglianza immunitaria innata e i programmi di segnalazione infiammatoria nel sistema nervoso centrale. Attraverso interazioni che influenzano la motilità dipendente da Rac/Rho e le risposte alla dinamica del calcio, Iba1 contribuisce agli stati di attivazione della microglia e alle risposte al danno tissutale. L’alterata espressione di Aif1/Iba1 è ampiamente utilizzata come marcatore di neuroinfiammazione ed è stata associata a fenotipi microgliali patologici in modelli di malattie neurodegenerative e neuroimmuni.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Iba1 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Aif1 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Aif1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Aif1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Iba1.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Aif1 per lo studio della segnalazione di Iba1, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Aif1 critici per la funzione di Iba1
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Aif1 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Iba1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Iba1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Aif1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Iba1 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Iba1 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Aif1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Aif1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.