Plasmide Double Nickase (h) HSPA1L: sc-400479-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HSPA1L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HSPA1L Double Nickase (h) et le plasmide HSPA1L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HSPA1L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HSPA1L Antibody (C-6): sc-393297
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HSPA1L | sc-400479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HSPA1L | sc-400479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA1L code un membre inductible par le stress de la famille de chaperonnes HSP70, qui soutient l’homéostasie des protéines en se liant aux polypeptides non repliés et en coordonnant leur repliement, leur trafic ou leur orientation vers la dégradation. HSPA1L participe à des réseaux cellulaires de protéostasie, notamment la signalisation de la réponse au choc thermique, des cycles d’ATPase régulés par des co‑chaperonnes, ainsi que des interactions avec les voies ubiquitine–protéasome et autophagie lors d’un stress protéotoxique. En modulant la capacité de repliement des protéines et la résilience au stress, HSPA1L est pertinent dans des contextes où l’équilibre des chaperonnes influence la survie cellulaire, la différenciation et des aspects de la biologie immunitaire ou reproductive. Une activité de chaperonnes dérégulée a été associée à une tolérance au stress modifiée et à des altérations du contrôle qualité des protéines liées à des maladies, faisant de HSPA1L une cible utile pour des études mécanistiques de la protéostasie.
HSPA1L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HSPA1L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HSPA1L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HSPA1L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HSPA1L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.