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HSP 56双切口酶质粒(h) | sc-403455-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP 56双切口酶质粒(h2) | sc-403455-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FKBP4 编码免疫亲和蛋白 FKBP52(HSP56),这是一种含 TPR 结构域的共伴侣蛋白,可与 HSP90 复合物结合,从而调控客户蛋白的折叠、稳定性与转运。它最为人所知的作用是调节类固醇激素受体的成熟与核转位,将伴侣蛋白活性与雄激素受体、糖皮质激素受体和孕激素受体信号通路联系起来。FKBP4 还可与细胞骨架运输机制发生相互作用,并通过蛋白质稳态(proteostasis)网络影响细胞应激反应。在癌症生物学与神经退行性疾病研究中,FKBP4/HSP90 共伴侣功能失调被认为与激素信号改变以及蛋白质稳态紊乱有关。
HSP 56 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FKBP4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FKBP4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FKBP4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FKBP4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。