Plásmido Doble Nickase (h) HoxD10: sc-403328-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxD10 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxD10 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxD10 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXD10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HoxD10 Anticuerpo (G-3): sc-166235
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxD10 | sc-403328-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxD10 | sc-403328-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD10 codifica el factor de transcripción con homeobox HoxD10, un regulador de unión al ADN específico de secuencia que ayuda a establecer la identidad posicional y los programas de diferenciación durante el desarrollo embrionario. En células humanas, HoxD10 influye en redes transcripcionales implicadas en la morfogénesis, la adhesión celular y la organización del citoesqueleto, integrándose con vías más amplias de patrón HOX y con efectores aguas abajo que modelan la arquitectura tisular. Se ha descrito una expresión desregulada de HOXD10 o alteraciones en sus circuitos reguladores en múltiples contextos tumorales, donde se estudia con frecuencia por su relación con la transición epitelio‑mesénquima, la expresión génica asociada a la invasión y el comportamiento metastásico. Como regulador del desarrollo con efectos dependientes del contexto, HOXD10 también se utiliza para investigar cómo se reconfiguran los programas transcripcionales a lo largo de la diferenciación y de estados relevantes para la enfermedad.
HoxD10 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXD10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXD10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXD10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXD10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.