Plasmide Double Nickase (h) HoxC6: sc-403393-NIC

HOXC6 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxC6, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à la séquence, qui coordonne la mise en place des axes antéro‑postérieurs et la spécification des lignages au cours du développement. Dans les cellules humaines, HoxC6 module des programmes transcriptionnels liés aux décisions de destin cellulaire, à la différenciation et à la morphogenèse des tissus, en s’intégrant à des réseaux régulateurs HOX plus larges et au contrôle de l’expression génique médié par la chromatine. Une expression dérégulée de HOXC6 a été associée à des états de différenciation altérés et à une reprogrammation transcriptionnelle observés dans de multiples types tumoraux, ce qui étaye sa pertinence pour l’étude de la signalisation oncogénique et de la dérégulation de réseaux géniques du développement. En tant que facteur de transcription nucléaire, HoxC6 est fréquemment étudié dans des contextes tels que les dynamiques épithélio‑mésenchymateuses, le contrôle de la prolifération et les phénotypes de type « cellules souches », via la régulation de gènes cibles en aval.

HoxC6 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXC6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXC6. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXC6. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXC6.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.