HoxC10 Lentiviral Activation Particles (m): sc-431637-LAC

Hoxc10 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor HoxC10, einen DNA-bindenden Regulator, der posteriore embryonale Gewebe ausprägt und zur Festlegung der regionalen Identität entlang der anterior–posterioren Achse beiträgt. In der Maus beeinflusst HoxC10 Linienentscheidungen und morphogenetische Programme, indem es entwicklungsbiologische Signaleingänge integriert und transkriptionelle Netzwerke koordiniert, die Differenzierung, Migration und Gewebeorganisation steuern. Seine Aktivität ist mit Entwicklungs-genregulatorischen Schaltkreisen verknüpft, zu denen auch andere HOX-Faktoren und Kofaktoren gehören, die den Chromatinzustand und die Enhancer-Auswahl regulieren. Eine fehlregulierte HOX-Genexpression, einschließlich veränderter HOXC10-Programme, wird in Studien zu aberranter Differenzierung und onkogener transkriptioneller Reprogrammierung häufig als molekularer Readout verwendet.

HoxC10 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Hoxc10-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HoxC10 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Hoxc10-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HoxC10-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Hoxc10-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.