Plasmide Double Nickase (h) HoxB4: sc-404013-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxB4 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxB4 Double Nickase (h) et le plasmide HoxB4 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXB4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HoxB4 Antibody (D-1): sc-365927
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxB4 | sc-404013-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxB4 | sc-404013-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXB4 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxB4, un régulateur se liant à l’ADN qui organise l’axe antéro-postérieur et spécifie l’identité cellulaire au cours du développement embryonnaire en contrôlant des programmes d’expression génique déterminant la lignée. Dans les tissus adultes, l’activité de HoxB4 est associée à l’auto-renouvellement et à la différenciation des cellules souches et progénitrices hématopoïétiques, en s’intégrant à des réseaux transcriptionnels développementaux comprenant des cofacteurs HOX et des complexes modificateurs de la chromatine. Une expression dérégulée de HOXB4 a été rapportée dans des hémopathies malignes et d’autres cancers, où une altération du contrôle transcriptionnel peut contribuer à une prolifération aberrante et à une différenciation déficiente. Parce que HoxB4 agit comme un régulateur maître, perturber HOXB4 constitue un point d’entrée accessible pour étudier la circuiterie transcriptionnelle, les transitions d’état épigénétique et la réactivation de voies développementales dans des modèles de maladie.
HoxB4 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXB4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXB4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXB4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXB4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.