Plasmide Double Nickase (h) HoxA9: sc-401583-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxA9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxA9 Double Nickase (h) et le plasmide HoxA9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXA9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HoxA9 Antibody (HOX5I043): sc-81291
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxA9 | sc-401583-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxA9 | sc-401583-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA9 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxA9, un régulateur clé de la mise en place de l’axe antéro‑postérieur et de l’engagement des lignées hématopoïétiques, via une liaison à l’ADN spécifique de séquence et le contrôle transcriptionnel de programmes géniques du développement. Dans les cellules humaines, HoxA9 contribue à coordonner prolifération et différenciation en modulant des réseaux impliqués dans le maintien des cellules souches, la maturation myéloïde et la régulation transcriptionnelle dépendante de la chromatine. Une expression dérégulée de HOXA9 est fréquemment associée à des états transcriptionnels leucémogènes et à une auto‑renouvellement altéré, ce qui en fait une cible largement étudiée dans les modèles de malignités hématopoïétiques. Son activité est également analysée en biologie du développement et en épigénétique afin de comprendre l’utilisation d’activateurs (enhancers) dépendante du contexte et les circuits de régulation des gènes.
HoxA9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXA9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXA9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXA9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXA9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.